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    實驗動物免疫方案

    發(fā)布時間: 2010-09-21  點擊次數(shù): 2230次

    實驗動物免疫方案

    1、抗原: 蛋白質、多肽、細胞器、細胞、組織等。

    2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。

    3、不同動物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例)

    >18-20kDa                  <18-20kDa

    動物     抗原量    *抗原量     抗原量    *抗原量

    兔子     20-200        100         50-400       200

    小鼠     2-40          15           4-60         40

    大鼠     10-50         30          20-150        50

    綿羊    100-1000       200         200-1000      400

    母雞     20-200        100          50-400       200

    單位:微克

    4、免疫方案(以免疫兔子為例):

    天數(shù)    0       14       28       38      56      66        87

    注射    x        x        x                x

    采血   2ml                        2ml           2+20ml     2+50-70ml

    5、注意:

    1)*次免疫用*佐劑與免疫原混合,以后加強免疫用不*佐劑與免疫原混合,采取多點,時間間隔式免疫法。

    2) 如果用細胞免疫兔子,那么每次免疫所需細胞量為2-3 x 107 cells。

    3) 在連續(xù)免疫完三次后,需要少量取血進行ELISA檢測,檢測所免疫動物的抗體滴度,一般滴度能達到1:10,000-50,000。在處死所免疫的動物前一周應加強一次免疫。

    4) 如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約50µl),zui后取眼球大量采血(大約500-1000µl);如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約2mL),zui后心臟大量取血(50-100mL)

    5) 按血清制備的標準方法將血清分離,并且分裝成小份,儲藏在-80oC。

     

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